SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TESTA
Chikungunya je rijetka virusna infekcija koja se prenosi ubodom zaraženog komarca Aedes aegypti.Karakterizira ga osip, vrućica i teška bol u zglobovima (artralgije) koja obično traje tri do sedam dana.Ime je izvedeno iz Makonde riječi koja znači "ono što se savija" u odnosu na pognuto držanje koje se razvilo kao rezultat artritičnih simptoma bolesti.Javlja se tijekom kišne sezone
u tropskim područjima svijeta, prvenstveno u Africi, jugoistočnoj Aziji, južnoj Indiji i Pakistanu.Simptomi se najčešće klinički ne razlikuju od onih koji se opažaju kod denga groznice.Doista, u Indiji je prijavljena dvostruka infekcija denge i chikungunya.Za razliku od denge, hemoragijske manifestacije su relativno rijetke i najčešće je bolest samoograničavajuća febrilna bolest.Stoga je vrlo važno
klinički razlikovati dengue od CHIK infekcije.CHIK se dijagnosticira na temelju serološke analize i izolacije virusa u miševa ili kulture tkiva.IgM imunotest je najpraktičnija laboratorijska metoda ispitivanja.Chikungunya IgG/IgM brzi test koristi rekombinantne antigene izvedene iz njegovog strukturnog proteina, otkriva IgG/IgM anti-CHIK u serumu ili plazmi pacijenta unutar 20 minuta.Test mogu izvesti neobučeni ili
minimalno kvalificirano osoblje, bez glomazne laboratorijske opreme.
NAČELO
Chikungunya IgG/IgM+NS1 antigen brzi test je kromatografski imunološki test s bočnim protokom.Test kaseta se sastoji od IgG/IgM trake i NS1 trake.
IgG/IgM traka: 1) jastučić konjugata tamnocrvene boje koji sadrži Chikungunya rekombinantne antigene ovojnice konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati denga groznice) i konjugati zečjeg IgG-zlata, 2) nitrocelulozna membranska traka koja sadrži dvije testne trake (G i M trake) i kontrolni pojas (C pojas).G traka je prethodno obložena antitijelom za otkrivanje IgG anti-Chikungunya virusa, M traka je obložena antitijelom za detekciju IgM anti-Chikungunya virusa, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-zečjim IgG.
NS1 traka: 1) jastučić konjugata bordo boje koji sadrži mišji anti-Chikungunya NS1 antigen konjugiran s koloidnim zlatom (Chikungunya Ab konjugati), 2) traka s nitroceluloznom membranom koja sadrži testnu traku (T traka) i kontrolnu traku (C traka).T traka je prethodno obložena zečjim anti-Chikungunya NS1 antigenom, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-mišjim IgG antitijelom.
IgG/IgM traka: Kada se odgovarajući volumen ispitnog uzorka rasporedi u jažicu za uzorak testne kasete, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kasete.IgG anti-Chikungunya virus, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Chikungunya.Imunokompleks je zatim zarobljen reagensom obloženim na G vrpci, formirajući G vrpcu u tamnocrvenoj boji, što ukazuje na pozitivan IgG rezultat testa na Chikungunya virus i ukazuje na nedavnu ili ponovljenu infekciju.IgM anti-Chikungunya virus, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Chikungunya.Imunokompleks je zatim zarobljen reagensom koji je prethodno obložen na M vrpci, formirajući bordo obojenu M vrpcu, što ukazuje na pozitivan rezultat IgM testa na Chikungunya virus i sugerira svježu infekciju.Odsutnost testnih vrpci (G i M) sugerira negativan rezultat. Test sadrži unutarnju kontrolu (C vrpca) koja bi trebala pokazati bordo obojenu vrpcu imunokompleksa kozjeg anti-zečjeg IgG/
zečji IgG-gold konjugat bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od T traka.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
NS1 traka: Kada se odgovarajući volumen ispitnog uzorka rasporedi u jažicu za uzorke u kaseti, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko ispitne kasete.Chikungunya NS1 Ag, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Chikungunya Ab.Imunokompleks se zatim hvata na membrani pomoću prethodno obloženog zečjeg anti-NS1 antitijela, formirajući bordo obojenu T traku, što ukazuje na Chikungunya Ag pozitivan rezultat testa.Odsutnost T trake ukazuje na negativan rezultat.Test sadrži internu kontrolu (C vrpca) koja bi trebala pokazivati bordo obojenu vrpcu imunokompleksa kozjeg anti-mišjeg IgG/mišjeg IgG-gold konjugata bez obzira na prisutnost obojene T vrpce.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
