SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TESTA
Virusi denga groznice, obitelj od četiri različita serotipa virusa (Den 1,2,3,4), jednosojni su virusi s ovojnicom pozitivnog RNA virusa.Viruse prenose komarci iz porodice Stegemyia koji grizu danju, uglavnom Aedes aegypti i Aedes albopictus.Danas je više od 2,5 milijarde ljudi koji žive u područjima tropske Azije, Afrike, Australije i Amerike u opasnosti od infekcije denga groznicom.Procjenjuje se da se godišnje u svijetu dogodi 100 milijuna slučajeva denga groznice i 250 000 slučajeva po život opasne denga hemoragijske groznice1-3.
Serološko određivanje IgM protutijela najčešća je metoda za dijagnosticiranje infekcije virusom denge.Nedavno je otkrivanje antigena koji se oslobađaju tijekom replikacije virusa u zaraženom pacijentu pokazalo vrlo obećavajuće rezultate.Omogućuje postavljanje dijagnoze od prvog dana nakon pojave groznice do 9. dana, nakon završetka kliničke faze bolesti, čime se omogućuje rano liječenje koje se trenutno postavlja4-. Dengue IgG/IgM brzi test razvijen je za otkrivanje cirkulirajućeg antigena denga groznice u serumu, plazmi ili punoj krvi.Test može izvesti neobučeno ili minimalno kvalificirano osoblje, bez laboratorijske opreme.
NAČELO
Dengue IgG/IgM brzi test je kromatografski imunološki test s bočnim protokom.Testna kaseta sastoji se od: 1) jastučića konjugata tamnocrvene boje koji sadrži antigene rekombinantne ovojnice denga groznice konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati denga groznice) i konjugatima zečjeg IgG-zlata, 2) membranske trake od nitroceluloze koja sadrži dvije ispitne trake (G i M trake) i kontrolnu traku (C traka).G traka je prethodno obložena antitijelom za detekciju IgG protiv denga virusa, M traka je presvučena antitijelom za detekciju IgM anti-denga virusa, a C traka je prethodno presvučena kozjim anti zečjim IgG.
Kada se odgovarajući volumen ispitnog uzorka rasporedi u jažicu za uzorak ispitne kasete, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kasete.IgG anti-denga virus, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate denga groznice.Imunokompleks je tada zarobljen reagensom obloženim na G vrpci, formirajući G vrpcu u bordo boji, što ukazuje na pozitivan IgG rezultat testa na virus denga groznice i ukazuje na nedavnu ili ponovljenu infekciju.IgM anti-denga virus, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate denga groznice.Imunokompleks je zatim zarobljen reagensom koji je prethodno obložen na M vrpci, formirajući tamnocrvenu M vrpcu, što ukazuje na pozitivan IgM rezultat testa virusa denga groznice i ukazuje na svježu infekciju.
Odsutnost ispitnih vrpci (G i M) ukazuje na negativan rezultat. Test sadrži internu kontrolu (C vrpca) koja bi trebala pokazivati bordo obojenu vrpcu imunokompleksa kozjeg anti-zečjeg IgG/zečjeg IgG-gold konjugata bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od T vrpci.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
