SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TESTA
Visceralna lišmanijaza ili Kala-azar je diseminirana infekcija koju uzrokuje nekoliko podvrsta L. donovani.Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) procjenjuje da ova bolest pogađa približno 12 milijuna ljudi u 88 zemalja.Na ljude se prenosi ugrizima pješčanih mušica Phlebotomus, koje se zaraze hraneći se zaraženim životinjama.Iako se radi o bolesti koja se nalazi u siromašnim zemljama, u južnoj je Europi postala vodeća oportunistička infekcija u oboljelih od AIDS-a.Identifikacija organizma L. donovani iz krvi, koštane srži, jetre, limfnih čvorova ili slezene daje definitivnu dijagnozu.Serološka detekcija anti-L.donovani IgM je izvrstan marker za akutnu visceralnu lišmaniozu.Testovi koji se koriste u klinici su ELISA, fluorescentna antitijela ili testovi izravne aglutinacije 4-5.Nedavno je korištenje L. donovani specifičnog proteina u testu dramatično poboljšalo osjetljivost i specifičnost.
Leishmania IgG/IgM Combo brzi test je serološki test baziran na rekombinantnim proteinima, koji otkriva IgG i IgM antitijela na L. Donovani istovremeno.Test daje pouzdan rezultat unutar 15 minuta bez ikakvih instrumenata.
NAČELO
Leishmania IgG/IgM brzi test je kromatografski imunološki test s bočnim protokom.Testna kaseta sastoji se od: 1) jastučića konjugata tamnocrvene boje koji sadrži rekombinantni antigen L. donovani konjugiran s koloidnim zlatom (konjugati Leishmania) i konjugati zečjeg IgG-zlata, 2) traka s nitroceluloznom membranom koja sadrži dvije testne trake (T1 i T2 trake) i kontrolni pojas (C pojas).Traka T1 je prethodno obložena monoklonskim anti-humanim IgM za detekciju anti-L.donovani IgM, T2 traka je prethodno obložena reagensima za detekciju anti-L.donovani IgG, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-zečjim IgG.
Kada se odgovarajući volumen ispitnog uzorka rasporedi u jažicu za uzorke u kazeti, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kazete.IgM L. donovani, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Leishmanije.Imunokompleks je zatim zarobljen na membrani pomoću prethodno obloženog anti-humanog IgM antitijela, tvoreći bordo obojenu T1 traku, što ukazuje na pozitivan rezultat L. donovani IgM testa.IgG L. donovani, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Leishmanije.Imunokompleks je tada zarobljen prethodno obloženim reagensima na membrani, tvoreći bordo obojenu T2 traku, što ukazuje na pozitivan rezultat testa L. donovani IgG.
Odsutnost T vrpci (T1 i T2) ukazuje na negativan rezultat.Test sadrži unutarnju kontrolu (C vrpca) koja bi trebala pokazivati bordo obojenu vrpcu imunokompleksa kozjeg anti-zečjeg IgG/zečjeg IgG-zlatnog konjugata bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od T vrpci.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
