SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TESTA
Malarija je hemolitička febrilna bolest koju prenose komarci i zarazi preko 200 milijuna ljudi i ubije više od milijun ljudi godišnje.Uzrokuju ga četiri vrste plazmodija: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Svi ti plazmodiji inficiraju i uništavaju ljudske eritrocite, uzrokujući zimicu, vrućicu, anemiju i splenomegaliju.P. falciparum uzrokuje ozbiljnije bolesti od ostalih plazmodijalnih vrsta i odgovoran je za većinu smrti od malarije, a jedan je od dva najčešća uzročnika malarije.
Tradicionalno, malarija se dijagnosticira pokazivanjem organizama na Giemsa obojenim debelim razmazima periferne krvi, a različite vrste plazmodija razlikuju se po njihovom pojavljivanju u zaraženim eritrocitima.Tehnika je sposobna za točnu i pouzdanu dijagnozu, ali samo kada je izvode vješti mikroskopisti koristeći definirane protokole, što predstavlja veliku prepreku za udaljena i siromašna područja svijeta.
Pf Ag brzi test razvijen je za rješavanje ovih prepreka.Otkriva Pf specifični antigen pHRP-II u uzorku ljudske krvi.Može ga izvoditi neobučeno ili minimalno kvalificirano osoblje, bez laboratorijske opreme.
NAČELO
Pf Ag brzi test je kromatografski imunološki test s bočnim protokom.Komponente testne trake sastoje se od: 1) jastučića konjugata tamnocrvene boje koji sadrži monoklonska anti-PHRP-II antitijela konjugirana s koloidnim zlatom (pHRP II-zlatni konjugati), 2) trake s nitroceluloznom membranom koja sadrži testnu traku (Pf) i kontrolnu traku (C traka).Pf traka je prethodno obložena poliklonskim anti-pHRP-II antitijelima, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-mišjim IgG.
Tijekom testa, odgovarajuća količina uzorka krvi se raspoređuje u jažicu za uzorke (S) testne kasete, pufer za lizu se dodaje u jažicu pufera (B).Pufer sadrži deterdžent koji lizira crvena krvna zrnca i oslobađa antigen pHRPII, koji migrira kapilarnim djelovanjem preko trake koja se drži u kazeti.Ako je pHRP-II prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate pHRP II-zlato.Imunokompleks je zatim zarobljen na membrani pomoću prethodno obloženih poliklonskih antipHRP II protutijela, tvoreći Pf traku bordo boje, što ukazuje na Pf pozitivan rezultat testa.
Odsutnost Pf pojasa ukazuje na negativan rezultat.Test sadrži unutarnju kontrolu (C vrpca) koja bi trebala pokazivati bordo obojenu vrpcu imunokompleksa kozjeg anti-mišjeg IgG / mišjeg IgG (pHRP II-zlatni konjugati) bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od Pf vrpci.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
