Detaljan opis
Metoda pregleda
Tri su glavne dijagnostičke metode za toksoplazmozu: patogena dijagnoza, imunološka dijagnoza i molekularna dijagnoza.Patogeni pregled uglavnom uključuje histološku dijagnozu, inokulaciju i izolaciju životinja te kulturu stanica.Uobičajene serološke dijagnostičke metode uključuju test boje, indirektni hemaglutinacijski test, neizravni imunofluorescentni test protutijela i enzimski imunoanalizu.Molekularna dijagnostika uključuje PCR tehnologiju i tehnologiju hibridizacije nukleinskih kiselina.
Fizikalni pregled trudnica i trudnica uključuje pregled pod nazivom TORCH.TORCH je kombinacija prvog slova engleskog imena nekoliko patogena.Slovo T označava Toxoplasma gondii.(Ostala slova predstavljaju sifilis, virus rubeole, citomegalovirus i herpes simplex virus.)
Princip provjere
Ispitivanje patogena
1. Izravni mikroskopski pregled pacijentove krvi, koštane srži ili cerebrospinalne tekućine, pleuralnog i ascitesa, sputuma, bronhoalveolarne tekućine za ispiranje, očne vodice, amnionske tekućine itd. za razmaze ili limfne čvorove, mišiće, jetru, placentu i druge dijelove živog tkiva, za bojenje po Reichu ili Jiju mikroskopski pregled može pronaći trofozoite ili ciste, ali pozitivna stopa nije visoka.Također se može koristiti za izravnu imunofluorescenciju za otkrivanje Toxoplasma gondii u tkivima.
2. Inokulacija životinja ili kultura tkiva Uzmite tjelesnu tekućinu ili suspenziju tkiva za testiranje i inokulirajte je u trbušnu šupljinu miša.Može doći do infekcije i pronaći patogene.Kada je prva generacija inokulacije negativna, treba je proći naslijepo tri puta.Ili za kulturu tkiva (stanice bubrega majmuna ili svinje) za izolaciju i identifikaciju Toxoplasma gondii.
3. Tehnologija hibridizacije DNA Domaći znanstvenici prvi su put upotrijebili sonde obilježene 32P koje sadrže specifične sekvence DNA Toxoplasma gondii za provođenje molekularne hibridizacije s DNA stanica ili tkiva u perifernoj krvi pacijenata, te su pokazali da su specifične hibridizacijske trake ili točke pozitivne reakcije.I specifičnost i osjetljivost bile su visoke.Osim toga, lančana reakcija polimerazom (PCR) također je uspostavljena u Kini za dijagnosticiranje bolesti, au usporedbi s metodama hibridizacije sonde, cijepljenja životinja i imunološkog ispitivanja pokazuje da je vrlo specifična, osjetljiva i brza.
Imunološki pregled
1. Antigeni koji se koriste za otkrivanje protutijela uglavnom uključuju tahizoitski topljivi antigen (citoplazmatski antigen) i membranski antigen.Protutijela prvih pojavila su se ranije (otkrivena testom bojenja i testom neizravne imunofluorescencije), dok su se druga pojavila kasnije (otkrivena testom neizravne hemaglutinacije itd.).U isto vrijeme, višestruke metode detekcije mogu imati komplementarnu ulogu i poboljšati stopu detekcije.Budući da Toxoplasma gondii može postojati u ljudskim stanicama dulje vrijeme, teško je razlikovati trenutnu infekciju od prošle infekcije otkrivanjem protutijela.Može se procijeniti prema titru protutijela i njegovim dinamičkim promjenama.
2. Detekcijski antigen se koristi za otkrivanje patogena (tahizoita ili cista) u stanicama domaćina, metabolita ili proizvoda lize (cirkulirajućih antigena) u serumu i tjelesnim tekućinama imunološkim metodama.Pouzdana je metoda za ranu dijagnozu i postavljanje sigurne dijagnoze.Znanstvenici u zemlji i inozemstvu uspostavili su McAb ELISA i sendvič ELISA između McAb i multiantitijela za otkrivanje cirkulirajućeg antigena u serumu akutnih pacijenata, s osjetljivošću od 0,4 μG/ml antigena.